Количественное определение билирубина в лекарственных препаратах альбумина человека методом флуоресцентной спектроскопии

Abstract

Целью настоящего исследования является разработка методического подхода к спектрофлуориметрическому определению билирубина в лекарственных препаратах (ЛП) альбумина человека. Наличие полосы испускания с максимумом при длине волны 520 нм в спектре флуоресценции свидетельствует о присутствии билирубина в ЛП "Альбуфарм, раствор для инфузий 200 мг/мл" (СП ООО "Фармлэнд", Республика Беларусь). Для расчета концентрации билирубина использован модифицированный нами метод стандартных добавок. Показано, что последовательное внесение добавок билирубина в разбавленный в 10 и 20 раз ЛП "Альбуфарм" приводит к увеличению интенсивности флуоресценции, обусловленному исключительно возрастанием концентрации свободного билирубина, а не связанного с альбумином, так как установлено, что процесс связывания является медленным. С учетом квантовых выходов флуоресценции свободного и связанного билирубина предложена формула для расчета интенсивности флуоресценции связанного билирубина. Получены графики линейной зависимости интенсивности флуоресценции связанного билирубина от концентрации добавленного билирубина в разбавленном в 10 и 20 раз ЛП "Альбуфарм". Концентрация билирубина в ЛП "Альбуфарм" составила 5,26 ± 0,04 мкМ, или 0,0154 ± 0,0001 мг/г альбумина. Исходя из литературных данных по содержанию связанного с альбумином билирубина в плазме крови здорового человека (в среднем 0,11 мг/г альбумина), можно сделать вывод, что применяемая технология очистки альбумина обеспечивает значительное снижение содержания билирубина.